polyacrylamide जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस के हो?

Polyacrylamide जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस

जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस जैविक विषयहरूमा प्रयोगशालाहरूमा एक आधारभूत प्रविधि हो, जसले DNA, RNA र प्रोटिनहरू जस्ता म्याक्रोमोलिक्युलहरूलाई अलग गर्न अनुमति दिन्छ। बिभिन्न पृथकीकरण मिडिया र संयन्त्रहरूले यी अणुहरूको उपसमूहहरूलाई तिनीहरूको भौतिक विशेषताहरूको शोषण गरेर अझ प्रभावकारी रूपमा अलग गर्न अनुमति दिन्छ। विशेष गरी प्रोटीनहरूको लागि, polyacrylamide जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस (PAGE) प्रायः छनौटको प्रविधि हो।

PAGE एउटा प्रविधि हो जसले म्याक्रोमोलेक्युलहरू जस्तै प्रोटीनहरूलाई तिनीहरूको इलेक्ट्रोफोरेटिक गतिशीलताको आधारमा अलग गर्छ, अर्थात्, विश्लेषकहरूको क्षमता विपरीत चार्जको इलेक्ट्रोड तिर जानको लागि। PAGE मा, यो चार्ज, साइज (आणविक वजन) र अणुको आकार द्वारा निर्धारण गरिन्छ। विश्लेषकहरू polyacrylamide जेलमा बनेको छिद्रहरू मार्फत सर्छन्। DNA र RNA को विपरीत, प्रोटीनहरू समावेश गरिएका एमिनो एसिडहरू अनुसार चार्जमा भिन्न हुन्छन्, जसले तिनीहरू कसरी दौडिन्छन् भनेर प्रभाव पार्न सक्छ। एमिनो एसिड स्ट्रिङहरूले माध्यमिक संरचनाहरू पनि बनाउन सक्छ जसले तिनीहरूको स्पष्ट आकारलाई असर गर्छ र फलस्वरूप तिनीहरू कसरी छिद्रहरू मार्फत जान सक्षम छन्। त्यसैले कहिलेकाहीं साइजको अधिक सटीक अनुमान आवश्यक भएमा इलेक्ट्रोफोरेसिस भन्दा पहिले प्रोटीनहरूलाई रेखीयकरण गर्न वांछनीय हुन सक्छ।

SDS पृष्ठ

सोडियम-डोडेसिल सल्फेट पोलीएक्रिलामाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस एक प्रविधि हो जुन 5 देखि 250 kDa मासको प्रोटीन अणुहरू अलग गर्न प्रयोग गरिन्छ। प्रोटीनहरू तिनीहरूको आणविक वजनको आधारमा मात्र अलग हुन्छन्। सोडियम डोडेसिल सल्फेट, एक एनियोनिक सर्फेक्टेन्ट, जेलको तयारीमा थपिन्छ जसले प्रोटीन नमूनाहरूको आन्तरिक शुल्कहरू मास्क गर्छ र तिनीहरूलाई मास अनुपातमा समान चार्ज दिन्छ। सरल शब्दहरूमा, यसले प्रोटिनहरूलाई विकृत गर्छ र तिनीहरूलाई नकारात्मक चार्ज दिन्छ।

मूल पृष्ठ

नेटिभ PAGE एउटा प्रविधि हो जसले प्रोटिनहरू अलग गर्नका लागि गैर-विकृत जेलहरू प्रयोग गर्दछ। SDS PAGE को विपरीत, जेल को तयारी मा कुनै denaturing एजेन्ट थपिएको छैन। नतिजाको रूपमा, प्रोटीनको विभाजन प्रोटीनको चार्ज र आकारको आधारमा हुन्छ। यस प्रविधिमा, प्रोटिनहरूको कन्फर्मेसन, फोल्डिङ र एमिनो एसिड चेनहरू कारकहरू हुन् जसमा विभाजन निर्भर हुन्छ। यस प्रक्रियामा प्रोटिनहरू क्षतिग्रस्त हुँदैनन्, र विभाजन पूरा भएपछि पुन: प्राप्त गर्न सकिन्छ।

Polyacrylamide जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस (PAGE) ले कसरी काम गर्छ?

PAGE को आधारभूत सिद्धान्त भनेको बिजुली प्रवाहको प्रयोग गरेर पोलीएक्रिलामाइड जेलको छिद्रहरूबाट पार गरेर विश्लेषकहरूलाई अलग गर्नु हो। यो प्राप्त गर्न, एक acrylamide-bisacrylamide मिश्रण अमोनियम persulfate (APS) थपेर polymerized (polyacrylamide) छ। प्रतिक्रिया, जुन tetramethylethylenediamine (TEMED) द्वारा उत्प्रेरित हुन्छ, छिद्रहरू सहितको नेट जस्तै संरचना बनाउँछ जसको माध्यमबाट विश्लेषकहरू सार्न सक्छन् (चित्र 2)। जेलमा समावेश गरिएको कुल एक्रिलामाइडको प्रतिशत जति उच्च हुन्छ, छिद्रको आकार सानो हुन्छ, त्यसैले प्रोटिनहरू सानो हुन्छ जुन पार गर्न सक्षम हुनेछ। acrylamide र bisacrylamide को अनुपातले छिद्रको आकारलाई पनि असर गर्छ तर यो प्रायः स्थिर रहन्छ। सानो छिद्र आकारले पनि गति घटाउँछ जसमा साना प्रोटिनहरू जेल मार्फत सार्न सक्षम हुन्छन्, तिनीहरूको रिजोल्युसनमा सुधार गर्दछ र तिनीहरूलाई बफरमा द्रुत रूपमा चल्नबाट रोक्छ जब करेन्ट लागू हुन्छ।

Polyacrylamide जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस को लागी उपकरण

जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस सेल (ट्यांक/चेम्बर)
Polyacrylamide जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस (PAGE) को लागि जेल ट्यांक agarose जेल ट्यांक भन्दा फरक छ। Agarose जेल ट्यांक तेर्सो छ, जबकि PAGE ट्यांक ठाडो छ। ठाडो इलेक्ट्रोफोरेसिस सेल (ट्यांक/चेम्बर) द्वारा, एउटा पातलो जेल (सामान्यतया 1.0mm वा 1.5mm) दुई गिलास प्लेटहरू बीच खन्याइन्छ र माउन्ट गरिन्छ ताकि जेलको तल्लो भाग एउटा च्याम्बरको बफरमा डुबेको हुन्छ र माथिल्लो भाग बफरमा डुबेको हुन्छ। अर्को कोठामा। जब करेन्ट लागू हुन्छ, थोरै मात्रामा बफर जेलको माध्यमबाट माथिल्लो चेम्बरबाट तलको च्याम्बरमा माइग्रेट हुन्छ। एसेम्ब्लीलाई ठाडो स्थितिमा रहन्छ भन्ने ग्यारेन्टी गर्न बलियो क्ल्याम्पको साथ, उपकरणले फरक ब्यान्डहरूको परिणाम स्वरूप कूलिंगको साथ द्रुत जेल रनलाई सुविधा दिन्छ।

Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) ले विभिन्न आकारका polyacrylamide जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस सेलहरू (ट्याङ्क/चेम्बरहरू) उत्पादन गर्छ। DYCZ-20C र DYCZ-20G मोडेलहरू DNA अनुक्रम विश्लेषणको लागि ठाडो इलेक्ट्रोफोरेसिस सेलहरू (ट्याङ्कहरू/चेम्बरहरू) हुन्। केही ठाडो इलेक्ट्रोफोरेसिस सेलहरू (ट्याङ्कहरू/चेम्बरहरू) ब्लटिंग प्रणालीसँग उपयुक्त छन्, जस्तै मोडेल DYCZ-24DN, DYCZ-25D र DYCZ-25E पश्चिमी ब्लोटिंग प्रणाली मोडेल DYCZ-40D, DYCZ-40G र DYCZ-40F, जुन प्रोटिन अणुलाई जेलबाट झिल्लीमा स्थानान्तरण गर्न प्रयोग गरिन्छ। SDS-PAGE इलेक्ट्रोफोरेसिस पछि, पश्चिमी ब्लोटिंग प्रोटीन मिश्रणमा एक विशिष्ट प्रोटीन पत्ता लगाउने एक प्रविधि हो। तपाईंले प्रयोगात्मक आवश्यकताहरू अनुसार यी ब्लटिंग प्रणालीहरू छनौट गर्न सक्नुहुन्छ।

इलेक्ट्रोफोरेसिस पावर सप्लाई
जेल चलाउनको लागि बिजुली प्रदान गर्न, तपाईंलाई इलेक्ट्रोफोरेसिस बिजुली आपूर्ति चाहिन्छ। Liuyi बायोटेक्नोलोजीमा हामी सबै अनुप्रयोगहरूको लागि इलेक्ट्रोफोरेसिस पावर आपूर्तिहरूको दायरा प्रदान गर्दछौं। उच्च स्थिर भोल्टेज र वर्तमानको साथ मोडेल DYY-12 र DYY-12C उच्च भोल्टेज आवश्यकता इलेक्ट्रोफोरेसिस पूरा गर्न सक्छ। यसमा स्ट्यान्ड, समय, VH र चरण-दर-चरण अनुप्रयोगको प्रकार्य छ। तिनीहरू IEF र DNA अनुक्रम इलेक्ट्रोफोरेसिस अनुप्रयोगको लागि आदर्श हुन्। सामान्य प्रोटिन र DNA इलेक्ट्रोफोरेसिस अनुप्रयोगको लागि, हामीसँग DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, र यस्तै अन्य मोडेलहरू छन्, जुन इलेक्ट्रोफोरेसिस सेलहरू (ट्याङ्कहरू/चेम्बरहरू) सँग तातो बिक्री शक्ति आपूर्तिहरू पनि हुन्। यी मध्य र कम भोल्टेज इलेक्ट्रोफोरेसिस अनुप्रयोगहरूको लागि प्रयोग गर्न सकिन्छ, जस्तै स्कूल प्रयोगशाला प्रयोगको लागि, अस्पताल प्रयोगशाला र यस्तै। पावर आपूर्तिका लागि थप मोडेलहरू, कृपया हाम्रो वेबसाइटमा जानुहोस्।

Liuyi ब्रान्डको चीनमा ५० वर्षभन्दा बढी इतिहास छ र कम्पनीले विश्वभर स्थिर र उच्च गुणस्तरका उत्पादनहरू उपलब्ध गराउन सक्छ। वर्षौंको विकासको माध्यमबाट, यो तपाईंको छनौटको योग्य छ!

हाम्रो बारेमा थप जानकारीको लागि, कृपया हामीलाई इमेल मार्फत सम्पर्क गर्नुहोस्[इमेल सुरक्षित] or [इमेल सुरक्षित].

polyacrylamide जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस के हो?
1. करेन स्टीवार्ड पीएचडी Polyacrylamide जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस, यसले कसरी काम गर्छ, टेक्निक भेरियन्टहरू, र यसको अनुप्रयोगहरू