नमूना तयारी रलोड गर्दै
अधिकांश अवस्थामा जेल स्ट्याक नगरी निरन्तर बफर प्रणालीको प्रयोगको कारण, नमूनाहरूमा उपयुक्त एकाग्रता र सानो मात्रा हुनुपर्छ। ए प्रयोग गर्नुहोस्पिपेटबिस्तारै नमूना थप्न, प्रति राम्रो 5-10 μg, रिजोल्युसनमा उल्लेखनीय कमीबाट बच्न। कहिलेनमूना लोड गर्दै, बिजुली आपूर्ति बन्द गर्नुपर्छ। नमूनामा यसको घनत्व बढाउन, नमूनालाई केन्द्रित गर्न र फैलावट रोक्नको लागि सूचक डाई (०.०२५% ब्रोमोफेनोल नीलो वा सुन्तला) र सुक्रोज (१०-१५%) वा ग्लिसरोल (५-१०%) हुनुपर्छ। यद्यपि, कहिलेकाहीँ सुक्रोज वा ग्लिसरोलले इलेक्ट्रोफोरेसिस परिणामहरूमा U-आकारको ब्यान्डहरू निम्त्याउन सक्छ, जुन 2.5% फिकोल (पोलिभिनिलपाइरोलिडोन) प्रयोग गरेर बच्न सकिन्छ।
इलेक्ट्रोफोरेसिस
इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि भोल्टेज 5-15 V/cm हुन्छ, सामान्यतया लगभग 10 V/cm। ठूला अणुहरूको विभाजनको लागि, भोल्टेज कम हुनुपर्छ, सामान्यतया 5 V/cm भन्दा बढी हुँदैन।
दाग लगाउने
फ्लोरोसेन्ट डाई इथिडियम ब्रोमाइड (EB) सामान्यतया agarose जेलमा DNA ब्यान्डहरू अवलोकन गर्न दागको लागि प्रयोग गरिन्छ। EB ले DNA अणुहरूको आधार जोडीहरू बीच सम्मिलित गर्न सक्छ, जसले गर्दा EB ले DNA सँग बाँध्छ। DNA द्वारा 260 nm पराबैंगनी प्रकाशको अवशोषण EB मा स्थानान्तरण गरिन्छ, र बाउन्ड EB ले दृश्य प्रकाश स्पेक्ट्रमको रातो-सुन्तला क्षेत्रमा 590 nm मा प्रतिदीप्ति उत्सर्जन गर्दछ। जेललाई 1 mmol/L MgSO4 समाधानमा 1 घण्टाको लागि दाग लगाउनाले अनबाउन्ड EB को कारणले हुने पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति कम गर्न सक्छ, DNA को थोरै मात्रा पत्ता लगाउन सजिलो हुन्छ।
EB डाईका धेरै फाइदाहरू छन्: यो प्रयोग गर्न सजिलो छ, न्यूक्लिक एसिड तोड्दैन, उच्च संवेदनशीलता छ, र DNA र RNA दुवै दाग हुन सक्छ। EB नमूनामा थप्न सकिन्छ र कुनै पनि समयमा UV अवशोषण प्रयोग गरेर ट्र्याक गर्न सकिन्छ। दाग पछि, EB लाई n-butanol संग निकासी द्वारा हटाउन सकिन्छ।
यद्यपि, EB डाई एक शक्तिशाली उत्परिवर्तजन हो, र ह्यान्डल गर्दा पोलिथीन पन्जा लगाउने जस्ता सावधानीहरू अपनाउनु पर्छ। Acridine सुन्तला पनि सामान्यतया प्रयोग हुने डाई हो किनभने यसले सिंगल-स्ट्र्यान्डेड र डबल-स्ट्र्यान्डेड न्यूक्लिक एसिडहरू (DNA, RNA) बीच फरक गर्न सक्छ। यसले डबल-स्ट्र्यान्डेड न्यूक्लिक एसिडहरूको लागि हरियो प्रतिदीप्ति (530 एनएम) र एकल-स्ट्र्यान्डेड न्यूक्लिक एसिडहरूको लागि रातो फ्लोरोसेन्स (640 एनएम) प्रदर्शन गर्दछ। थप रूपमा, अन्य रंगहरू जस्तै मेथिलिन नीलो, मिथाइलीन हरियो, र क्विनोलिन बी दागको लागि प्रयोग गर्न सकिन्छ।
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ले हाम्रो आफ्नै व्यावसायिक प्राविधिक टोली र R&D केन्द्रसँग ५० वर्षभन्दा बढी समयदेखि इलेक्ट्रोफोरेसिस उपकरण निर्माणमा विशेषज्ञता हासिल गरेको छ। हामीसँग डिजाइन देखि निरीक्षण, र गोदाम, साथै मार्केटिङ समर्थन सम्म विश्वसनीय र पूर्ण उत्पादन लाइन छ। हाम्रा मुख्य उत्पादनहरू इलेक्ट्रोफोरेसिस सेल (ट्याङ्क/चेम्बर), इलेक्ट्रोफोरेसिस पावर सप्लाई, नीलो एलईडी ट्रान्सिल्युमिनेटर, यूभी ट्रान्सिल्युमिनेटर, जेल छवि र विश्लेषण प्रणाली आदि हुन्।
हामी अब साझेदारहरू खोजिरहेका छौं, दुबै OEM इलेक्ट्रोफोरेसिस ट्यांक र वितरकहरूलाई स्वागत छ।
यदि तपाईंसँग हाम्रा उत्पादनहरूको लागि कुनै खरिद योजना छ भने, कृपया हामीलाई सम्पर्क गर्न नहिचकिचाउनुहोस्। तपाईले हामीलाई इमेलमा सन्देश पठाउन सक्नुहुन्छ[इमेल सुरक्षित]वा[इमेल सुरक्षित], वा कृपया हामीलाई +86 15810650221 मा कल गर्नुहोस् वा Whatsapp +86 15810650221, वा Wechat: 15810650221 थप्नुहोस्।
Whatsapp वा WeChat मा थप्न कृपया QR कोड स्क्यान गर्नुहोस्।
पोस्ट समय: डिसेम्बर-20-2023